ID 32 E是鉴定肠杆菌科和其它营养要求不高的革兰氏阴性杆菌的系统，使用32个标准化和微量化的生化测定和—个专门的数据库。该系统能鉴定的所有细菌见使用说明后的菌名表。 接种、判读结果和解释可用自动化程序，也可用人工方法。
原理
ID 32 E鉴定试条是由32个干燥的培养基测定小管所组成。
液体接种、培养24小时后。用ATB Express仪或微型API仪或人工判读结果。
鉴定结果藉助于相应的鉴定软件得到。
试剂
一个试剂盒包括：
25条ID 32 E鉴定试条
25个培养盒
25张报告单
1份说明书
另需以下产品(不包括在试剂盒内)：
0．85％NaCL培养基，2mL（＃20 070）如果使用ATB接种器则3m1（＃20 040）
试剂：JAMES（＃70 540）和OX（＃70 460）
石蜡油（＃70 100）
ATB电子加样器（＃99 040）或接种器（＃15 740）和Tip头（＃15 710）
比浊：比浊计（＃99 234）或ATB比浊仪或麦氏标准浊度管（＃70 900）；
ATB Express仪或微型API仪和鉴定软件；
安瓿管架（＃70 200）
必要时，补充：
- OF培养基（＃50 110）测定对葡萄糖代谢氧化和发酵作用。
- M培养基（＃50 120）测定动力。
需配备的实验室设备：
- 37℃培养箱
- 冰箱
- 本生灯或酒精灯
- 记号笔
培养基和试剂的组成
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0.85％NaCl基物
2或3ml |
NaCL 8.5g
无菌蒸馏水 1000ml |
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JAMES试剂 5ml |
J 2183化合物 0.5g
HCl 1N qsp 100ml
S24/25：避免接触到皮肤和眼睛。
假如进入眼睛，立即用充足的水冲洗至少10分钟。
假如接触到皮肤，用香皂和充足的水洗手。 |
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0X试剂
5ml |
四甲基—对苯撑二胺 1g
异戍醇 100ml
危害
R10：易燃的
R20：吸入有害
S24/25：避免接触皮肤和眼睛。 |
贮存
ID 32 E鉴定试条、培养基在包装上标明的有效期内，应该保存在2-8℃。
试剂在包装上标明的有效期内保存在2-8℃。
JAMES和0X试剂在安瓿管打开后只能保存一个月，并应将试剂转到滴瓶保存(并在瓶上标上日期)。
JAMES和0X试剂对光极敏感；必须用箔纸将瓶包住，要用时才拿出冰箱，不要在外放置时间过长。
试剂的使用
使用前将试剂放至室温20-30℃
1. OX试剂：
Ÿ 按照“注意事项”中的指南打开安瓿管（有滴嘴帽）。
Ÿ 取出试剂一滴。
Ÿ 小心拧紧试剂瓶盖，按照“试剂的保存”指南保存试剂。
2．JAMES 试剂：
Ÿ 按“注意事项”中的指南打开盛有James试剂及其溶剂的安瓿管（无滴嘴帽）。
Ÿ 用干燥吸管吸取溶剂小心地滴入有经脱水处理的干粉试剂瓶中。
Ÿ 小心拧紧试剂瓶盖，并振摇。
Ÿ 等待5～10分钟，待干粉完全溶解。
Ÿ 小心拧紧试剂瓶盖，并按“试剂保存”指南保存试剂。
警告及注意事项：
Ÿ 仅用于体外诊断
Ÿ 实验技术人员需进行无菌操作并且警惕病原菌的传染。
Ÿ 不要用嘴通过吸管吸取样本或试剂。
Ÿ 不要使用过期试剂。
Ÿ 置冰箱试剂使用之前应放至室温（20 ～30℃）。
Ÿ 按以下方法小心打开安瓿管：
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- 用手垂直握住安瓿瓶(白色瓶盖朝上)。
- 尽量将瓶盖压下。
- 用大姆指顶住瓶盖上斜面部分。
- 向外加压，使瓶盖内瓶尖断裂。
* 无滴头的安瓿
- 小心取开瓶盖
* 有滴头的安瓿瓶
- 垂直倒置安瓿
- 挤压瓶盖，将所有试剂倒入滴瓶 |
Ÿ 所有接种物均需认作具有传染性，应适当处理。
Ÿ 所有病人标本和微生物培养物均是潜在的传染体， 并根据1993年 NCCLS M29-T2:CDC《微生物学和生物医学实验室的生物安全手册 》预防污染。
Ÿ 在完成实验,读取和判定结果后，所有的标本、溢出物和培养物品均须高压灭菌，经杀菌剂浸泡或烧毁。
Ÿ 结果的解释应由了解病人的病史、标本来源、菌落特征及显微镜形态学特征的微生物专家的进行，若有需要应结合抗生素敏感情况。
使用说明
Ÿ 标本和细菌培养物均应当作传染体，并由受过训练、有经验的技师做适当处理。
Ÿ 无菌操作和对细菌的防备措施均应按严格的操作程序进行；防备措施参考：（NCCLS M29-T2，第2版，试行指南：防止实验人员通过血液、体液、和组织感染传染性疾病的保护措施）
选取菌落
ID 32 E鉴定试条用于营养要求不高的革兰氏阴性杆菌。
将几个待测菌落划线于分离平板上，按以下步骤挑取菌落进行氧化酶测定：
- 取一片滤纸置玻片上。
- 以一滴无菌蒸馏水湿润纸片。
- 用玻棒或木棍挑取菌落抹在湿润的滤纸上。
- 加一滴OX试剂，在1～2分钟内呈现紫色者，则为阳性反应。
用实验室常用的、无抑制剂或有抑制剂的营养培养基分离菌落，以作ID 32 E鉴定:
- 麦康凯+结晶紫
- 溴甲酚紫
- Trypcase Soy Agar（TSA）
- Hektoen
- 木糖一赖氨酸-脱氧胆盐(XLD)
- 沙门氏菌—志贺氏菌培养基(SS)
- 脱氧胆盐一柠檬酸钠一乳糖—蔗糖培养基(DCLS)
- 曙红一甲兰培养基(EMB)
注意：有特殊营养需求的菌例如：布鲁氏菌属(BruceLla)、费朗西丝菌属(Francisella)、鼠疫耶尔森氏菌(Yersinia pestis)、类鼻疽假单胞菌(Pseudomonas pseudomallei)等不包括在ID 32 E数据库中。选择适当的操作排除或确定它们的存在。
鉴定试条的准备
Ÿ 从包装袋中取出鉴定试条；
Ÿ 去掉干燥剂；
Ÿ 盖上鉴定试条的盖子；
Ÿ 在鉴定试条伸出的边沿处记录菌株信息。
接种物的制备
Ÿ 打开一支0.85%NaCL基物安瓿管，2ml(如用接种器，则3mL)或自制的无菌的生理盐水。
Ÿ 取一个或几个待测菌落，制备浊度相当于0.5麦氏单位的菌悬液，用ATB比浊仪测量或与麦氏标准浊度管相比。
注意：如果自动读取鉴定试条结果，则必须用比浊仪调菌悬液的浊度。
试验条的接种
Ÿ 自动接种：
- 将鉴定试条、已接种的0．85%NacL基物的安瓿和Tip头放在ATB接种器的架子上。
- 接种器自动混匀安瓿中的菌悬液，在鉴定试条每一小孔内注入55ml菌悬液。
Ÿ 手工接种:
- 混匀已接种的0.85％NaCL基物安瓿中的菌悬液，用ATB电子加样器在鉴定试条中的每一小孔定量注入55μl 菌悬液。
Ÿ 在以下试验管中各滴2滴石蜡油覆盖：鸟氨酸脱羧酶（ODC）、精氨酸双水解酶(ADH)、赖氨酸脱羧酶 | 