原理
快速ID 32 A鉴定试条是由32个孔组成,其中29个用作为测定孔,并含脱水测定底物。
有氧条件下培养4小时之后,可用人工读取结果或使用ATB Express仪或微型API仪判读结果。
鉴定结果藉助于相应的鉴定软件所得。
一个试剂盒包括:
- 25条快速ID 32 A鉴定试条;
- 25个培养盒;
- 25份结果报告单;
- 1份说明书。
另需以下产品(不包括在试剂盒内):
- 悬浮液2ml(#70 070),如果用ATB接种器则3ml(#70 640)
- 试剂:JAMES试剂(#70 540)、NIT1试剂(#70 440)和NIT2试剂(#70 450)、FB试剂(#70 560)
- 石蜡油(#70 100)
- 无菌棉签(#70 610);
- ATB电子加样器(#99 040)或接种器(#15 740)和Tip头(#15 710)
- 比浊:比浊计(#99 234)或ATB比浊仪或麦氏标准浊度管(#70 900);
- ATB Express仪或微型API仪和鉴定软件;
- 安瓿管架(#70 200)
- 厌氧罐+气体发生器;
- 新鲜制备的血琼脂平板(哥伦比亚琼脂+ 5%马或绵羊血+维生素K3)。
需配备的实验室设备:
- 37℃培养箱
- 冰箱
- 本生灯或酒精灯
- 记号笔
培养基和试剂的组成
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悬浮液
2ml或3ml |
无菌蒸馏水 |
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JAMES
试剂
5ml |
J2183成分 0.5g
HCL 1N qsp 100ml
S24/25:避免接触皮肤和眼睛。
假如进入眼睛,立即用充足的水冲洗至少10分钟。
假如接触到皮肤,用香皂和充足的水洗手。 |
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NIT1试剂 |
对氨基苯磺酸 0.4g
乙酸 30g
H2O 70ml
腐蚀性
R34:引起燃烧。
S2:放在小孩接触不到的地方。
S23:不要吸入挥发物。
S26:假如进入眼睛,立即用充足的水冲洗并找医生。 |
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NIT2试剂 |
N—N二甲基—1—萘胺 0.6g
乙酸 30g
H2O 70ml
腐蚀性
R34:引起燃烧。
S2:放在小孩接触不到的地方。
S23:不要吸入试剂。
S26:假如进入眼睛,立即用充足的水冲洗并找医生。 |
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FB试剂
5ml |
坚牢兰BB(>0.1%) 0.35g
十二烷基硫酸钠 7.5g
有机溶剂 100ml
毒性
R61:对胎儿有危害。
R20/21/22:吸入、接触皮肤、吞入均有害。
R36:刺激眼睛。
S53:避免暴露试剂。(避免接触皮肤和眼睛,雾化吸入,和过热)
S45:如感不适,请立即找医师。 |
贮存
快速ID 32 A鉴定试条、培养基在包装上标明的有效期内,应该保存在2-8℃。
试剂在包装上标明的有效期内,应该在2-8℃、避光保存。
试剂在安瓿管打开后保存一个月,并应将试剂转到滴瓶(并在瓶上标上日期)。
JAMES和FB试剂对光极敏感;必须用箔纸将瓶包住。要用时才拿出冰箱,不要在外放置时间过长。
JAMES试剂变成黑褐色,不应在使用。
试剂的使用
使用前将试剂放至室温20-30℃
1. NIT1和NIT2试剂:
按照“注意事项”中的指南打开安瓿管(有滴管盖)
取出试剂一滴
按照“试剂的保存”指南,用后小心盖上,并按“试剂保存”指南保存试剂。
2.JAMES 和FB 试剂:
按“注意事项”中的指南打开盛有James或FB试剂及其溶剂的安瓿管(无滴管盖)。
用干燥滴管吸取溶剂小心地滴入经脱水处理的干粉试剂瓶中。
把滴管帽装上瓶口。
仔细盖上瓶子,并振摇。
等待5~10分钟,待干粉完全溶解。
小心拧紧试剂瓶盖,并按“试剂保存”指南保存试剂。
注意事项:
仅用于体外诊断
实验技术人员需进行无菌操作并且警惕病原菌的传染。
不要用嘴通过吸管吸取样本或试剂。
不要使用过期试剂。
置冰箱试剂使用之前应放至室温(20 ~30℃)。
按以下方法小心打开安瓿管:
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- 用一手垂直握住安瓿管 (白色的塑料管向上)。
- 用力向下压住盖子。
- 用拇指压在瓶盖的斜面向外用力折断瓶盖里面的安瓿管上部。
- 对无滴嘴帽的安瓿管:小心移动盖子。
- 有滴管帽的安瓿管:将安瓿倒置,保持垂直位置,挤压瓶盖将所有试剂挤入滴管瓶中。 |
所有接种物均需认作具有传染性,应适当处理。
所有病人标本和微生物培养物均是潜在的传染体, 并根据1993年 NCCLS M29-T2:CDC《微生物学和生物医学实验室的生物安全手册 》预防污染。
在完成实验,读取和判定结果后,所有的标本、溢出物和培养物品均须高压灭菌,经杀菌剂浸泡或烧毁。
结果的解释应由了解病人的病史、标本来源、菌落特征及显微镜形态学特征的微生物专家的进行,若有需要应结合抗生素敏感情况。
使用说明
标本和细菌培养物均应当作传染体,并由受过训练、有经验的技师做适当处理。
无菌操作和对细菌的防备措施均应按严格的操作程序进行;防备措施参考:(NCCLS M29-T2,第2版,试行指南:防止实验人员通过血液、体液、和组织感染传染性疾病的保护措施)
附加的预防措施,参考《微生物学和生物医学实验室的生物安全手册》 (CDC 93-8395,第3版,1993年5月)或各国的规程。
选择菌落
将一个已分离好的菌落转入新制备的血琼脂平板(Columbia基础琼脂+5%马或羊血+维生素K3)。
厌氧条件中培养24或48小时。
鉴定试条的准备
从包装袋中取出鉴定试条;
去掉干燥剂;
盖上鉴定试条的盖子;
在鉴定试条边沿处记录菌株信息。
接种物的准备